政府建造100多艘三層槳戰船,擴建各項防禦工事,並加強海軍訓練,30多個城邦結成軍事同盟,推舉擁有強大陸軍的斯巴達為盟主,隨時準備抗擊波斯入侵。
公元前480年春,大流士一世的繼承者薛西斯一世出動約25萬人、1000艘戰船大舉遠征希臘。波斯軍分水陸兩路,沿色雷斯西進,占領北希臘,迫使一些城邦投降,攻克希臘中部溫泉關之後,繼而問中希臘進軍。陸軍進占雅典城,大肆破壞劫掠;其海軍繞過阿提卡半島南端的蘇尼翁角,進入狹窄的薩拉米斯海峽。9月下旬,薩拉米斯海戰開始,波斯艦隊在數量上占絕對優勢,呈圍攻態勢。希臘艦隊隱藏在艾加萊奧斯山後,編成兩線戰鬥隊形,勇敢地發起攻擊。希臘戰船船體小,運動自如,能夠靈活地襲擊敵艦。船體碩大的波斯戰船調度失靈,陷於被動挨打的境地,甚至自相碰撞而沉沒。波斯海軍遭受重大損失,新征希臘的薛西斯一世深恐後路被切斷,倉皇敗逃回國。其陸軍退至北希臘。公元前479年8月中甸,希波雙方陸軍在布拉底附近舉行決定性會戰。斯巴達統帥包桑尼率領希臘聯軍約10萬人,重創占有明顯優勢的波斯陸軍,波斯人的第三次遠征以失敗告終。
波斯遠征希臘失敗,加之帝國內部矛盾重重,被迫退居守勢。以雅典為首的希臘則逐漸轉入進攻,並乘機擴張海上勢力,建立雅典在愛琴海域的霸權。公元前478年,雅典艦隊占領赫勒斯滂海峽北岸的重鎮塞斯托斯,從而控制了通向黑海的要道。同年(一說前477年),雅典聯合一批希臘城邦組成海上同盟,奪取色雷斯沿岸地區、愛琴海上許多島嶼和戰略要地拜占庭。公元前449年,希臘海軍在賽普勒斯島東岸的薩拉米斯城附近重創波斯軍,至此雙方同意媾和。雅典派全權代表卡里阿斯赴波斯首都蘇薩談判並簽訂了《卡里阿斯和約》。和約規定:波斯放棄對愛琴海及赫勒斯滂和博斯普魯斯海峽(黑海出口)的控制,承認小亞細亞西岸希臘諸城邦的獨立地位。希波戰爭至此結束。
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